Grazie per la collaborazione Giando. Ora però servirebbero quegli appunti sulla spettrofotometria, anche perché mi sono dovuto assentare un attimo mentre spiegava. Oltre alle fotocopie, che dovrebbe scannerizzare Gino, chi ha informazioni può postarle gentilmente?
Ma veniamo all'attività svolta il giorno 02/04/2009
In questa data ci siamo proposti di misurare la quantità di lattosio presente in un campione di latte pari a 20 ml di alimento posti in un matraccio tarato (in realtà ne sono stati pesati 21,7585 g) . Allo scopo, abbiamo sfruttato la proprietà di tale zucchero di essere riducente. Tuttavia, prima di operare con un reattivo di Fehling, è stato necessario eliminare dal campione tutte le sostanze che interferiscono con il colore e rendono opaco il latte: i grassi e in misura minore le proteine. I primi infatti costituiscono una emulsione, le seconde un colloide. Eliminando entrambe si ottiene una soluzione vera (di zuccheri e sali) assolutamente limpida. Per fare ciò, dopo aver aumentato il battente di liquido versando 60 ml di acqua, è stata indotta una coagulazione acida delle proteine con qualche goccia di acido acetico glaciale, ossia puro (la quantità non è determinante) e aggiunto qualche millilitro di Carrez I e II. Anche in questo caso la quantità non è importante: in particolare noi abbiamo operato con 3 ml del primo e altrettanti del secondo. I due Carrez in soluzione acquosa gelificano inglobando nella struttura le particelle grasse. Si porta poi il tutto al volume di 100 ml.Una volta ottenuto il precipitato proteico e intrappolati i grassi nel Carrez, si filtra il tutto attraverso una speciale carta porosa. Come ci si aspettava, il filtrato è assolutamente limpido. Il contenuto di lattosio durante questa operazione è rimasto ovviamente invariato. A questo punto si è potuto procedere con la titolazione (inversa, poiché il campione "titola" la soluzione a concentrazione nota), noto il dato sperimentale che 5 ml di soluzione Fehling (A+
titolano (in questo caso, sono titolati da) 0,0676 g di lattosio. Sono stati quindi posti 5 ml di Fehling A e altrettanti di Fehling B in una beuta a collo largo (si è notato un colore blu intenso) e aggiunti 40 ml di acqua, nonché delle sferette di vetro (che nel seguito avranno il compito di rendere il fenomeno di ebollizione meno impetuoso); la soluzione zuccherina è stata invece versata in una buretta. Abbiamo dunque lasciato gocciolare come di consueto il liquido dalla buretta alla beuta, provvedendo però in questo caso a fornire energia termica (la reazione è endotermica). La variazione del colore da blu a rosso mattone indica l'avvenuta riduzione del reattivo. Tale variazione, impossibile da notare senza aver preventivamente eliminato l'opacità come sopra descritto, è evidenziata da un particolare indicatore aggiunto a gocce (blu di metilene all’1%). La quantità di soluzione zuccherina necessaria alla titolazione è risultata essere pari a 7,45 ml.
L'esperimento termina qui, non ci resta che fare due conti. Prestate attenzione al ragionamento. All'inizio non mi era chiaro come risalire alla quantità di lattosio presente nel campione, poi una mia visita in lab in compagnia di Luana mi ha illuminato (veramente la prof l'ha fatto :sun: ).
Se 0,0676 g di lattosio titolano 10 ml di Fehling, allora in quei 7,45 ml ci sono proprio 0,0676 g di lattosio (dato che anch'essi hanno titolato 10 ml di soluzione). Attenzione anche a questo dato: alcuni testi riportano 5 ml, poiché si intende 5 di Fehling A e altrettanti di B: di fatto dunque 10. Variazioni sul tema ci sono anche sul fattore 0,0676: alcune fonti riportano 0,0678; tenete presente che si tratta di un dato sperimentale, e la differenza è minima (meno dello 0,3%). Dunque, capito che in 7,45 ml di latte vi sono 0,0676g di lattosio, rapportando ai 100 ml totali si ottiene 0,907 g. (0,0676:7,45=x:100). Questi sono i grammi di lattosio presenti nel nostro campione di 21,7585 g; per sapere quanti grammi di lattosio vi sono in 100g di latte, scriviamo una nuova proporzione:
0,907:21,7585=x:100
da cui si ricava che la percentuale di lattosio nel latte esaminato è del 4,17%
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Per quanto riguarda i Fehling, nel file di Giando ci sono già delle informazioni, comunque rintracciabili cercando in rete.
Sui Carrez invece ho notato la totale mancanza di dati. Se trovate qualcosa, vi prego di postare. Intanto ecco almeno la loro composizione
Carrez 1: Ferrocianuro di potassio al 15%
Carrez 2: Idrossido di potassio al 30%